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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心質(zhì)控生物試劑細(xì)胞凍存液AC-1001012埃澤思細(xì)胞凍存液

埃澤思細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品簡介

埃澤思細(xì)胞凍存液
安全:無外源蛋白成分,大大降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風(fēng)險(xiǎn)。
穩(wěn)定:全程無血清生產(chǎn),批次間差異小。
高效:凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高于 90%。
簡單:即用型產(chǎn)品,且無需程序降溫可直接-80℃過夜后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。

更新時(shí)間:2024-10-08
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埃澤思細(xì)胞凍存液

ES/iPS Crypreservation Media

一、產(chǎn)品基本信息

二、產(chǎn)品簡介

ES/iPS 埃澤思細(xì)胞凍存液是埃澤思生物(Applied Cell®)自主開發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的干細(xì)胞凍 存液,適用于人多能干細(xì)胞(hES/hiPS)的凍存。本產(chǎn)品生產(chǎn)過程遵循 ISO9001 體系,并符合 GMP 指導(dǎo) 原則。

三、產(chǎn)品特性

安全:無外源蛋白成分,大大降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風(fēng)險(xiǎn)。

穩(wěn)定:全程無血清生產(chǎn),批次間差異小。

高效:凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高于 90%。

簡單:即用型產(chǎn)品,且無需程序降溫可直接-80℃過夜后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。

四、產(chǎn)品內(nèi)容

五、相關(guān)產(chǎn)品

人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基(Applied Cell®: Cat. no.AC-1001000)

人多能干細(xì)胞消化液(Applied Cell®: Cat. no.AC-1001008)

無血清細(xì)胞凍存液(治療級(jí))(Applied Cell®:AC-1001006)

即用型基質(zhì)膠(Applied Cell®: Cat. no. C-1001007)

六、細(xì)胞凍存操作方法

1. 準(zhǔn)備對(duì)數(shù)期生長的干細(xì)胞,加入人多能干細(xì)胞消化液(AC-1001008)消化 3~5 min,用 2mL 人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基(AC-1001000)制備成細(xì)胞懸液;

2. 1200 rpm 3min 離心,棄上清,用 1.5-2mL ES/iPS 細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,細(xì)胞密度 1×106~1×107 /mL;

3. 轉(zhuǎn)移至凍存管中,無需程序降溫,直接將待凍存細(xì)胞置于 -80℃過夜,后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存,凍 存時(shí)注意直立放置凍存管;

七、細(xì)胞復(fù)蘇

1. 基質(zhì)膠包被培養(yǎng)板:取出 6 孔板/12 孔板,每孔內(nèi)加入 1 mL/0.5 mL 即用型基質(zhì)膠(AC-1001007, 輕輕晃動(dòng) 6 孔板/12 孔板使基質(zhì)膠*覆蓋皿底,置于 37℃培養(yǎng)箱中孵育 1h~2h,實(shí)驗(yàn)前拿出并置于 超凈工作臺(tái)/生物安全柜中室溫下平衡 20min。如果暫時(shí)不用,可用 Parafilm 封口后 2-8℃ 儲(chǔ)存,并 于 1 周內(nèi)使用。

注意:①一支凍存的干細(xì)胞的數(shù)量在 1×106cells/mL 左右,對(duì)應(yīng) 6 孔板 1 孔;即用型基質(zhì)膠對(duì)溫 度敏感,即用即拿,用完后立即放回 4℃冰箱保存,且勿用手直接觸碰基質(zhì)膠液面所及的瓶身,影響 基質(zhì)膠質(zhì)量。

2. 先將 2~3mL 的干細(xì)胞培養(yǎng)基加入 15mL 離心管中備用。

3. 解凍:將從液氮中取出的凍存管快速浸入 37℃溫水中,快速搖動(dòng),使其在 1~2min 內(nèi)快速解凍; 注意:細(xì)胞從液氮中拿出的速度要快,盡量減少其暴露在室溫中的時(shí)間。

4. 離心:凍存管中的凍存液解凍后,將其逐滴加入含有干細(xì)胞培養(yǎng)基的 15mL 離心管中,將 15mL 離心 管置于低速離心機(jī)中配比平衡后,1200 rpm 離心 3min;

5. 重懸:離心后棄上清加 1mL 人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)干細(xì)胞沉淀進(jìn)行吹吸混勻,吹吸 3~5 次左右。

6. 接種:吹吸均勻后,將已經(jīng)平衡好的即用型基質(zhì)膠棄掉,將吹打均勻的干細(xì)胞懸液加入到已經(jīng)包被 好的 6 孔板中,并補(bǔ)全每孔 2mL 培養(yǎng)體系。

7. 培養(yǎng):接種后的 6 孔板可以置于倒置相差顯微鏡下觀察接種的干細(xì)胞密度以及細(xì)胞團(tuán)塊大小,呈 4 個(gè) 細(xì)胞以上的團(tuán)塊較合格,水平十字輕輕晃動(dòng) 6 孔板/12 孔板使細(xì)胞均勻分布。并置于 37℃,5% CO2 的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),第 2 天觀察細(xì)胞貼壁情況;

八、細(xì)胞形態(tài)圖

九、質(zhì)量控制

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